液氮(dàn)罐(guàn)在(zài)細胞培養過程(chéng)中(zhōng)的(dí)使用

　　細胞培養(yǎng)的一(yī)般(bān)過程主要包括(kuò)四(sì)個(gè)步(bù)驟(zhòu):準備(bèi)，材(cái)料(liào)提(tí)取，培(péi)養(yǎng)和冷凍復(fù)蘇(sū)。為了保(bǎo)存(cún)細(xì)胞(bāo)，尤(yóu)其是(shì)不(bù)易獲得(dé)的突(tū)變細胞或細(xì)胞株，應冷凍(dòng)細(xì)胞。冷(lěng)凍溫度(dù)一般采用196℃液(yè)氮溫度(dù)，將(jiāng)細胞收集到冷(lěng)凍管(guǎn)中(zhōng)，加(jiā)入(rù)含有保護(hù)劑(一(yī)般(bān)為二(èr)甲(jiǎ)基亞(yà)或(huò)甘油)的(dí)培養(yǎng)基，冷(lěng)卻速度一(yī)定，後(hòu)儲存(cún)在(zài)液氮罐中。在(zài)低的溫(wēn)度(dù)下(xià)，細胞的保(bǎo)存時(shí)間幾乎是無限的(dí)。

　　胚胎冷(lěng)凍保(bǎo)存技(jì)術

　　胚胎冷凍保(bǎo)存技(jì)術(shù)是指(zhǐ)利用低溫保(bǎo)護劑在(zài)低溫條件(jiàn)下保存(cún)胚胎(tāi)的技(jì)術。這(zhè)項技術是由於(yú)人工授精技術在20世(shì)紀(jì)下半葉(yè)的(dí)廣泛應用而(ér)產(chǎn)生(shēng)的。動(dòng)物胚胎(tāi)的冷凍(dòng)保存原理是由(yóu)於(yú)低(dī)溫降低(dī)了胚(pēi)胎(tāi)內的(dí)變(biàn)質反(fǎn)應(yīng)速(sù)度。溫(wēn)度(dù)越(yuè)低，胚胎保(bǎo)存時間越(yuè)長。

　　目前研究了慢(màn)速(sù)冷凍(dòng)，快(kuài)速冷(lěng)凍，一步冷凍，直(zhí)接移植冷凍，玻璃化(huà)冷(lěng)凍等多(duō)種胚(pēi)胎(tāi)冷(lěng)凍保存(cún)方(fāng)法(fǎ)。玻(bō)璃(lí)化(huà)冷凍(dòng)法的步驟如下(xià):

　　①在室(shì)溫(wēn)下(xià)將胚胎(tāi)放(fàng)入25%的(dí)玻(bō)璃(lí)溶液(VS液(yè))中進(jìn)行(háng)預處理(lǐ)15分(fēn)鐘(zhōng)。

　　②在(zài)高(gāo)濃度(dù)(75%190%)的(dí)VS液中保存預(yù)處理後(hòu)的胚胎20-40分(fēn)鐘。金(jīn)鳳液(yè)氮(dàn)罐(guàn)

　　③將(jiāng)經過兩步(bù)抗(kàng)凍處理的(dí)胚(pēi)胎直接(jiē)放入液氮(dàn)中保存。金(jīn)鳳液氮罐

　　另外，菌(jūn)種，疫(yì)苗(miáo)，骨(gǔ)組織(zhī)，精子等物質(zhì)也(yě)可(kě)以用(yòng)液(yè)氮(dàn)罐保存，都能(néng)達(dá)到良(liáng)好的長期儲存效果(guǒ)。